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利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISAkit是否檢測(cè)目的抗原
發(fā)布時(shí)間： 2018-06-21 點(diǎn)擊次數(shù)： 2139次酶免疫技術(shù)是三大經(jīng)典標(biāo)記免疫技術(shù)之一，是以酶標(biāo)記抗體或抗原為主要試劑的一種標(biāo)記免疫分析技術(shù)。隨著相關(guān)新技術(shù)的不斷問(wèn)世，如雜交瘤單克隆抗體技術(shù)（使各種對(duì)抗原決定簇高度特異的單克隆抗體可以在體外批量生產(chǎn)）、生物素－親和素放大系統(tǒng)的應(yīng)用以及與化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的偶聯(lián)等，明顯地提高民分析和測(cè)定方法的特異性、靈敏度及其自動(dòng)化程度，使酶免疫技術(shù)不斷更新，應(yīng)用范圍不斷拓寬。當(dāng)前，酶免疫技術(shù)已與形式各異、各具特點(diǎn)和用途的定位、定量和超微量測(cè)定的標(biāo)記免疫分析技術(shù)融合發(fā)展，在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)中的應(yīng)用日益廣泛，是取代放射免疫技術(shù)的主要方法之一。 然而，近來(lái)許多客戶(hù)向我們反映一些唯利是圖的公司和小作坊，用假冒偽劣的ELISA試劑盒坑害廣大的科研工作者，他們往往唯利是圖，無(wú)視科學(xué)研究的嚴(yán)謹(jǐn)性和嚴(yán)肅性，讓廣大的科研工作者被動(dòng)造假，嚴(yán)重?cái)_亂了科研工作，嚴(yán)重?cái)_亂了市場(chǎng)秩序，所以我們有義務(wù)，有責(zé)任揭露這些作偽造假者制作假冒偽劣ELISA試劑盒的手法，本期為您解析利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原，方法如下：
（1）將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液
（2）37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體
（3）后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物
（4）實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說(shuō)明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原，該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
（5）如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)線性，則說(shuō)明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測(cè)作用，則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。